เมื่อทำการบ่มเพาะเชื้อแล้ว
เราต้องทำให้mix culture มันกลายเป็น subculture
ก่อนที่จะไปสู่ Pure culture ในขั้นตอนต่อไป
เราต้องทำให้mix culture มันกลายเป็น subculture
ก่อนที่จะไปสู่ Pure culture ในขั้นตอนต่อไป

นั่นก็คือ Primary identification of Bacteria
อันได้แก่
- Gram's stain
- Catalase test
- Oxidase test
- OF-test
ในแลปนี้ อาจารย์ให้ทำ primay test แค่สองตัว นั่นคือ
- Catalase test
- Oxidase test
โดยมีวิธีการดังนี้
Catalase test
หลักการ : เป็นการทดสอบว่าแบคทีเรียมี enz. Catalse หรือไม่
โดย enz Catalase ในแบคทีเรียมันจะ คะตะไลส์ ไฮโดรเจนเปอออกไซด์ให้กลายเป็นน้ำ
ดังนั้น เมื่อเราทำการทดลอง ถ้ามันคือ Positive ละก็
"เราจะสังเกตเห็นฟองก๊าซเมื่อเขี่ยเชื้อแบคทีเรียลงบนแผ่นสไลด์ที่มีน้ำยา 3% H2O2"
นำกระจก Slide มาหยด 3% H2O2 ไปประมาณ 1 หยด
l
l
l
เขี่ยนเชื้อจาก plate ที่อาจารย์เตรียมไว้สำหรับการทดลองนี้
l
l
l
สังเกตฟองก๊าซว่าเกิดขึ้นหรือไม่
---------------------------------------
Oxidase Test
หลักการ : เป็นการทดสองว่า เชื้อแบคทีเรียนมี enz Oxidase หรือไม่ โดยที่ enz Oxidase จะออกซิไดส์
น้ำยา tetramethl-p-phenylene-diamine dihydrochlorine ได้สารประกอบสีม่วงน้ำเงินขึ้นภายใน 10 วินาที
ถ้าผลการทดลองเป็น possitive ละก็ จะได้สารประกอบสีม่วงน้ำเงินขึ้นภายใน 10 วินาที
นำกระดาษกรองมาวางบนกระจกSlide
l
l
l
หยดน้ำยา Oxidase reagent 2-3 หยด ลงบนประดาษกรอง
l
l
l
ใช้ loop เขี่ยเชื้อมาขีดบนกระดาษกรองเป็นลักษณะเส้นตรง 1 ขีด แล้วสัวเกตุผล ดังรูป

l
l
l
หยดน้ำยา Oxidase reagent 2-3 หยด ลงบนประดาษกรอง
l
l
l
ใช้ loop เขี่ยเชื้อมาขีดบนกระดาษกรองเป็นลักษณะเส้นตรง 1 ขีด แล้วสัวเกตุผล ดังรูป


ปล.
- อย่าหยดน้ำยามากเกิน เพราะมันจะล้น slide (กำ -*-)
- ในการทดลอง catalase test ตอนเอาเชื้อใส่บน slide ห้ามคนเด็ดขาดเพราะเมื่อคนแล้วเชื้อจะทำปฏิกิรยา
กับสารและอากาศมันก็จะเกิดฟองก๊าซขึ้นหมดนั่นแหละ
จะทำให้เราแยกไม่ได้ว่า ฟองก๊าซที่มันเกิดขึ้นมา เป็นเพราะผลการทดลองหรือว่ามัน error
การเตรียมบ่มเพาะเชื้อ Vet. Bacteria iden. lab
edit @ 2006/11/18 15:33:02

